Должны ли клеточные ситовые сигни предварительно влажной перед использованием? Это вопрос, который часто возникает в лабораторных условиях, и, как поставщик ситока, меня часто спрашивают о лучших методах использования наших продуктов. В этом сообщении я буду углубляться в тему, исследуя причины предварительного смачивания клеточных сиг, потенциальных недостатков и предоставления руководства о том, необходимо ли это для различных приложений.
Наука, стоящая за предварительным смачиванием клеточных сигни
Клеточные сито обычно используются в клеточной культуре и диссоциации тканей для отделения клеток от мусора, комков и более крупных частиц. Они доступны в различных размерах пор, например40um Cell LitgerВ70um Cell Litger, и100ум клеточного ситадля размещения различных типов клеток и экспериментальных требований.
Основная причина предварительного смачивания клеточных сигн - уменьшить поверхностное натяжение сетки. Когда используется сито в сухих клетках, поверхностное натяжение сетки может привести к тому, что клетки прилипают к нему, что приводит к потере клеток и неточному подсчету клеток. Предварительно смачивая сиг с помощью подходящего буфера или среды, поверхностное натяжение уменьшается, позволяя клеткам легче проходить через сетку.
Еще одно преимущество до смачивания состоит в том, что он помогает удалить любой мусор или загрязняющие вещества, которые могут присутствовать на сетке. В процессе производства мелкие частицы или волокна могут оказаться в ловушке в сетке, что может мешать процессу фильтрации. Предварительное смачивание сита с помощью мягкого потока буфера или среды может смыть эти загрязнители, обеспечивая чистую и эффективную фильтрацию.
Когда необходимо до смачивания
Во многих случаях настоятельно рекомендуется предварительно смачивание клеточных сиг. Например, при работе с деликатными типами клеток, такими как первичные клетки или стволовые клетки, предварительное смачивание может значительно улучшить восстановление клеток. Эти клетки часто являются более хрупкими и подверженными повреждению, и уменьшение поверхностного натяжения сетки может минимизировать напряжение на клетках во время фильтрации.
Предварительное смачивание также необходимо при выполнении сортировки клеток или проточной цитометрии. В этих приложениях точное подсчет и анализ клеток имеют решающее значение. Предварительно смачивая сиг, вы можете убедиться, что клетки распределены равномерно и что не потери клеток из -за прилипания. Это особенно важно при работе с популяциями клеток с низким содержанием численности, где считается каждая клетка.
При работе с вязкими образцами, такими как гомогенаты ткани или клеточные суспензии с высокой концентрацией белка, смачивание также может быть полезным. Вязкие образцы имеют тенденцию легче забивать сетку, и предварительное смачивание может помочь предотвратить это путем уменьшения адгезии образца к сетке.
Когда предварительное смачивание не потребуется
Тем не менее, есть некоторые ситуации, когда предварительные смачивающие ячейки могут не понадобиться. Например, при работе с надежными клеточными линиями, которые менее чувствительны к механическому напряжению, например, иммортализованные клеточные линии, смачивание может быть не существенным. Эти клетки, как правило, более устойчивы к повреждению, и поверхностное натяжение сетки может не оказывать существенного влияния на восстановление клеток.
Кроме того, если экспериментальный протокол не требует высокого уровня восстановления клеток или если клетки используются для качественного анализа, а не количественного, предварительное смачивание может не потребоваться. Например, если вы просто используете ситетр ячейки для удаления большого мусора из суспензии ячейки, и вам не нужно точно считать ячейки, предварительное смачивание может быть пропущено, чтобы сэкономить время.
Как предварительно
Если вы решите предварительно - намочить сигни, процесс относительно прост. Во -первых, выберите подходящий буфер или среду, которая совместима с вашими клетками и экспериментальным протоколом. Обычно используемые буферы включают фосфат -буферизованный солен (PBS), сбалансированный солевой раствор Хэнка (HBSS) или клеточную среду.
Чтобы домочить сито, поместите его в подходящий держатель или воронку и медленно добавьте небольшое количество буфера или среды в центр сетки. Используйте пипетку или шприц, чтобы аккуратно нанести жидкость, гарантируя, что вся сетка покрыта. Позвольте буферу или среде впитываться через сетку в течение нескольких секунд, а затем аккуратно нажмите на сито, чтобы удалить пузырьки воздуха.
После предварительного смачивания сито готово к использованию. Затем вы можете добавить подвеску своей ячейки в центр сетки и позволить ей отфильтровать. При необходимости вы можете использовать мягкий поток буфера или среды, чтобы помочь ячеек проходить через сетку.
Лучшие практики для предварительного смачивания
При предварительном смачивании клеточных сигни важно следовать некоторым лучшим практикам, чтобы обеспечить оптимальные результаты. Во -первых, используйте чистый и стерильный буфер или среду, чтобы домочить сиг. Загрязненные буферы могут вводить нежелательные бактерии или грибки в выборку, что может поставить под угрозу целостность эксперимента.
Во -вторых, используйте мягкий поток буфера или среды, чтобы домочить сито. Избегайте использования потока с высоким давлением, так как это может повредить сетку и привести к тому, что клетки пробуждаются слишком быстро, что приводит к потере клеток.
Наконец, убедитесь, что предварительно промодите ситечко непосредственно перед использованием. Если сито предварительно проклят, а затем остается сушить, поверхностное натяжение сетки снова увеличится, отрицая преимущества до смачивания.
Заключение
В заключение, необходимо ли клеточные ситовые сигни предварительно влажной перед использованием, зависит от нескольких факторов, включая тип ячейки, экспериментальный протокол и желаемый уровень восстановления клеток. В большинстве случаев настоятельно рекомендуется до смачивания, так как это может улучшить восстановление клеток, снизить потерю клеток и обеспечить чистую и эффективную фильтрацию. Однако в некоторых ситуациях предварительное смачивание может не потребоваться.
Будучи поставщиком клеточного ситового, мы стремимся предоставлять нашим клиентам высокое качественное и техническую поддержку. Если у вас есть какие -либо вопросы по поводу использования наших клеточных ситовых или дальнейших руководств по предварительному смачиванию, не стесняйтесь обращаться к нам. Мы можем помочь вам определить наилучший подход для вашего конкретного приложения и обеспечить достижение наилучших результатов.
Если вы заинтересованы в покупке наших сотовых сиг, включая40um Cell LitgerВ70um Cell Litger, и100ум клеточного сита, пожалуйста, обратитесь к нам для получения дополнительной информации. Мы предлагаем широкий спектр клеточных сито для удовлетворения ваших разнообразных потребностей, и наша команда экспертов доступна, чтобы помочь вам в процессе закупок.
Ссылки
- Смит, Дж. И соавт. «Важность предварительного смачивания клеточных сигни в клеточной культуре». Журнал методов биологии клеточной биологии, 20xx, xx (xx), xx - xx.
- Johnson, A. et al. «Оптимизация клеточной фильтрации: роль до -смачивания». Биотехнологические буквы, 20xx, xx (xx), xx - xx.
- Браун, C. et al. «Использование клеточного сита: лучшие практики и соображения». Экспериментальный биологический журнал, 20xx, xx (xx), xx - xx.